• 技術(shù)文章

    Technical articles

    當(dāng)前位置:首頁(yè)技術(shù)文章正確保存抗體

    正確保存抗體

    更新時(shí)間:2015-04-02點(diǎn)擊次數(shù):2260

    正確保存抗體,你了解嗎?

      

    抗體保存得當(dāng)與否,直接決定了抗體的活性和使用效果!如果抗體保存得當(dāng),大部分抗體活性都可以維持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。

    請(qǐng)謹(jǐn)記!無(wú)論何時(shí)(請(qǐng)按照說(shuō)明書(shū)推薦的保存條件正確保存抗體

    1. 收到抗體后請(qǐng)務(wù)必在12000rpm離心1-5分鐘后再打開(kāi)管蓋進(jìn)行分裝和保存(如果抗體體積小于50ul,請(qǐng)延長(zhǎng)離心時(shí)間至5分鐘,以保證全部抗體均離心下來(lái))!為了昂貴&珍貴的抗體,請(qǐng)看清是12000rpm

    2. 對(duì)于大部分抗體,比較合適的保存方式是分裝后保存在 -20℃ or -80℃ 。對(duì)絕大多數(shù)抗體來(lái)說(shuō),保存在-20℃是*足夠了。沒(méi)有任何證據(jù)顯示保存在-80℃會(huì)有更多的好處!

        分裝可以zui大程度的降低反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害,同時(shí)也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。分裝的量以一次實(shí)驗(yàn)用完為好,zui少不能少于10ul每份。因?yàn)榉盅b體積越小,抗體的濃度越可能會(huì)受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響,復(fù)融后的分裝抗體如果一次用不完,將剩余母液保存在4℃,避免再凍起來(lái)!抗體工作液應(yīng)該當(dāng)天配制當(dāng)天用完,在4℃盡量不要超過(guò)1天。避免將抗體保存在自動(dòng)除霜冰箱中。盡量將抗體保存在冰箱里層,而不是門(mén)上。

    3. 大部分抗體收到后4℃短暫保存1-2周對(duì)抗體活性是沒(méi)有影響的。如果抗體很快(1-2周)會(huì)使用,推薦在4℃保存,這是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害。如果要長(zhǎng)期保存則是在-20℃ or -80℃。zui關(guān)鍵的一點(diǎn)是要根據(jù)說(shuō)明書(shū)推薦的方式來(lái)正確的保存抗體!

    但是,腹水形式的產(chǎn)品請(qǐng)?jiān)谑盏胶罅⒓磧銎饋?lái)!因?yàn)樵擃惍a(chǎn)品含有大量的蛋白酶,長(zhǎng)期在4℃保存會(huì)導(dǎo)致抗體的降解!

    4. 大部分抗體的運(yùn)輸條件:一般的運(yùn)輸過(guò)程需要1-2周的時(shí)間,所以是在4℃的條件下來(lái)完成的。4℃運(yùn)輸zui主要的目的是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害(如果使用干冰運(yùn)輸,那么收到時(shí)抗體是凍起來(lái)的,為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過(guò)程)。所以運(yùn)輸過(guò)程中避免干冰運(yùn)輸!

    特殊抗體的保存條件;

    酶聯(lián)抗體:永遠(yuǎn)保存在4℃,避免凍起來(lái)。否則會(huì)導(dǎo)致酶活性的下降或者喪失

    偶聯(lián)抗體:所有偶聯(lián)抗體都需要在棕色管中或使用錫箔紙避光4℃保存。尤其是熒光抗體,對(duì)光極為敏感,因此在所有的實(shí)驗(yàn)階段也是要避光操作的!

    IgG3的同型對(duì)照:永遠(yuǎn)保存在4℃,避免凍起來(lái)。因?yàn)槿绻霈F(xiàn)凍融過(guò)程,該抗體非常容易形成多聚體

    無(wú)論是保存還是運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融,反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致抗體變性,導(dǎo)致多聚體形成,從而降低抗體的結(jié)合能力!

    抗體保存其它相關(guān)信息:

    關(guān)于加入甘油保存

    有些人會(huì)加50%的甘油到抗體中來(lái)避免反復(fù)凍融,甘油在-20℃ 會(huì)降低冰點(diǎn)。這對(duì)很多抗體可能是可行的。加入甘油的溶液不建議在-80℃保存,因?yàn)檫@已經(jīng)超過(guò)了甘油的冰點(diǎn)。如果您要加入甘油來(lái)保存抗體的話,請(qǐng)謹(jǐn)慎注意無(wú)菌操作,避免污染!

    關(guān)于蛋白保護(hù)劑:

    蛋白在高濃度時(shí)更不容易降解(1 mg/ml 或者更高),這就是為什么在抗體中加入BSA之類作為穩(wěn)定劑的原因了;另一方面,加入的蛋白穩(wěn)定劑也可以減少抗體由于管壁吸附所造成的損失。但是如果抗體要用來(lái)標(biāo)記的話,則不能加入蛋白穩(wěn)定劑,因?yàn)檫@些穩(wěn)定劑會(huì)和抗體一起競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合標(biāo)記物。

    關(guān)于*(sodium azide)的使用:

    為了防止微生物污染,*經(jīng)常被加入到抗體中(終濃度0.02% (w/v))。很多抗體已經(jīng)含有了0.02%-0.05%的*,在說(shuō)明書(shū)的“Storage buffer"中有標(biāo)明的。

    在下述情況中不能使用*:

    如果抗體用于染色或處理活細(xì)胞,用于體內(nèi)研究:

    *在抵抗微生物的同時(shí),對(duì)其它大部分有機(jī)物也是有毒的,因?yàn)樗钄嗔司€粒體的cytochrome electron transport system.

    要偶聯(lián)帶有氨基基團(tuán)的抗體:

    *會(huì)干擾任何含有氨基基團(tuán)的偶聯(lián),因此在進(jìn)行偶聯(lián)之前,應(yīng)將*去除。偶聯(lián)后的抗體可以加入*保存,但是濃度只能是0.01%。對(duì)于需要偶聯(lián)的抗體,thimerosal (merthiolate)可以替代*作為保護(hù)劑!

     

    主站蜘蛛池模板: 国产成人小视频| 成人免费看吃奶视频网站| 欧洲成人午夜精品无码区久久| 国产成人欧美一区二区三区| 国产成人久久精品麻豆二区| 亚洲精品成人久久| 成人性生交大片免费看| 国产成人在线观看网站| 精品无码成人久久久久久| 国产成人精品免费视频大全麻豆| 四虎成人精品免费影院| 成人黄色电影在线观看 | 免费成人av电影| 成人毛片免费观看视频在线| 亚洲国产成人在线视频| 国产成人精品永久免费视频| 精品成人AV一区二区三区| 国产国产成人精品久久| 怡红院成人在线| 最新国产成人ab网站| 99久久精品国产一区二区成人 | 国产成人综合洲欧美在线| 青青草国产成人久久91网| 国产成人 亚洲欧洲| 国产成人精品久久| 国产成人综合在线视频| 欧洲成人在线视频| 成人看片黄在线观看| 色老成人精品视频在线观看| 免看**毛片一片成人不卡| 免费看成人aa片无码视频吃奶| 成人av电影网站| 国产精品成人一区二区三区| 在线观看国产成人AV天堂| 国产精品成人一区无码| 成人免费播放视频777777| 日本成人免费在线视频| 成人小视频在线观看免费| 在线观看成人网| 国产成人精品一区二区三区免费 | 久久久久99精品成人片直播|